6.3. Обеззараживающие средства, используемые в шелководстве

Считают, что на необходимость обеззараживать червоводни впервые
указал Л. Пастер, хотя чутье шелководов подсказало им задолго до
этого возможность избежать заболевания шелковичных червей, если
пгред г ы корм ко it или во время ее проведения «отпугнуть» болезни;
они окуривали помещения, сжигая хвсрсст хвойных деревьев или
можжевельник, не подозревая при этом, что слабое обеззараживающее
действие дыма объясняется присутствием в нем небольшого количества
формальдегида. Практиковалось также опрыскивание гусениц винным
уксусом, который, как стало известно позже, способен убить возбудителя
мускардины. Постепенно под интуицию народного знахарства
IB области предотвращения болезней была подведена научная основа,
испытано обеззараживающее действие различных средств, в том числе
тех, которые были подсказаны народным опытом.
В шелководстве из физических средств, помимо механической
чистки, уборки помещений , мытья инвентаря с использованием щелочной
воды или других моющих средств чаще других пользуются солнечным
светом, затем — крутым кипятком, паром при морке коконов,
горячим утюгом — при обеззараживании спецодежды, полотенец,
бумажных съемников, изоляционных марлевых мешочков и т. п. Из
химических средств наибольшее распространение получили формалин,
хлорамин и негашеная известь.
Формалин. В шелководстве — у нас и за рубежом — широко применяют
влажную обработку 2—4%-ным формалином, представляющим
собой водный раствор формальдегида. Формалин — прозрачная,
бесцветная жидкость, легко распознаваемая по едкому запаху, раздражающему
слизистые глаз и органов дыхания. Получают его окислением
метилового спирта, который всегда содержится в небольшом
количестве (до 15%) в формалине. По существующим правилам формалин
должен содержать 37% формальдегида; обычно количество его
колеблется от 35 до 40%. Кроме формальдегида и метилового алкоголя,
в формалине иногда есть примесь ацетона, муравьиной и уксусной
кислот.
Испытывая доброкачественность формалина, главное внимание
обращают на процентное содержание формальдегида, отсутствие избытка
кислоты и весомого остатка при прокаливании. Количественно
формальдегид определяют йодометрически.
С увеличением концентрации формальдегида в растворе начинают
появляться более сложные гидраты; это наблюдается при выпаривании
формалина, а в крепких растворах, содержащих более 30% формальдегида,—
самопроизвольно, при длительном хранении. Из разнообразных
продуктов полимеризации можно отметить группу параформальдегидов
или параформов — (СН20)гсН20. Параформ— белое
пещество, при нагревании с водой он снова дает воднорастворимый
СН 20, а без воды — газообразный формальдегид. Чтобы предотвратить
быструю полимеризацию раствора, его хранят при ровной
среднем температуре, в защищенном от прямых солнечных лучей
месте.
Растворами формальдегида дезинфицируют червоводни, листохра-
нилнща, гренохранилища, инкубатории, производственные гренажные
помещения, инвентарь (за исключением металлических предметов,
которые при длительном соприкосновении с растворами формальдегида
портятся), а также грену.
Дезинфицирующие сеойстеэ формальдегида объясняются резко
выраженной способностью давать продукты присоединения (уплотнения)
с аминокислотами, протеинами и вызывать необратимую коагуляцию
белков протоплазмы. По этой же причине непосредственнее
соприкосновение 4%-ных растворов со слизистой вызывает омертвение.
Формальдегид жадно поглощается веществами, особенно пористыми,
например, пористой поверхностью нештукатуренных стен,
но неглубоко в них проникает, не портит их, умерщвляет микроб в,
особенно поверхностно расположенных, быстро испаряется, лучше
действует в присутствии водяных паров и тем сильнее, чем выше температура.
Лучшее время для дезинфекции растворами формальдегида—
душные, насыщенные влагой, теплые дни. При низкой температуре
(15—16°С) бактерицидное действие формальдегида значительно слабее;
поэтому во время дезинфекции температура воздуха должна быть
не ниже 20°С, а относительная влажность — не ниже 70%.
Троицкая и Насратуллаев (1982) показали эффективность дезинфекции
4%-ным формалином помещений шелководческих комплексов по
отношению к их бактериальному загрязнению. После предварительной,
предвыкормочной дезинфекции количество бактерий в воздухе помещений
сократилось в 60 раз, а на поверхности стен и выкормочных этажерок
— в 3 раза. За время выкормки (30 дней) количество бактерий
в воздухе возросло в 14 раз и достигло 114 тыс. микробных клеток
в 1 м3; на стенах возросло в 9 раз, на этажерках — в 4 раза. Увеличение
количества бактерий — результат сосредоточенности гусениц
в помещении, больших масс поступающих на выкормку отнюдь не
стерильных листьев, скопления экскрементов и других остатков черио-
кормления, недостаточной эффективности мер по поддержанию санитарного
состояния выкормок. После заключительной дезинфекции
в воздухе помещения количество бактерий уменьшилось в 142 и в
110 раз (по данным двух лет); на стенах количество их сократилось
в 145 и 73 раза, а на этажерках — в 130 и 97 раз.
Следует иметь в виду, что летальная экспозиция для вегетативных
клеток бактерий во много раз меньше, чем для их спор. Вирусы
ядерного полиэдроза при 24°С в 4%-ном формалине погибают через
15 мин.
Т. Кагава (1980) изучал эффективность формалина как дезинфицирующего
средства против спор возбудителя пебрины. Зависимость
гибели спор от условий использования формалина, его концентрации,
времени воздействия на споры он выяснял применительно к еднеп из
пяти температур, при которых проводились наблюдения: 5°, 10°, 15е,
20° и 25°С. Результативность обеззараживания им выражена в процентах
гибели гусениц после заражения их спорами, выдержанными
в формалине. Результаты сгруппированы в следующие три ступени
эффективности: гибель 100% спор, гибель от 50 до 100%, гибель 50%
и меньше количества спор. Итоги многочисленных опытов он представил
в графиках, изобразив три ступеии эффективности в виде трех
зон, соответственно обозначенных знаками +, ±, —; параметры зон
для каждой из пяти температур были ограничены по оси абсцисс —
концентрацией формалина в рабочих растворах, а по оси ординаг —

длительностью их воздействия на споры (рис. 100). Центральное место
среди испытанных концентраций занимают растворы 2—4%-ного формалина,
чаще всего применяемые на практике и не только в шелководстве;
при 20°С эффект этих концентраций равнозначен, если длительность
контактного действия раствора может быть обеспечена в течение
16 мин. Минимальная экспозиция, обеспечивающая полную, 100%-ную
гибель спор—4 мин,раствор 8%-ный, температура 25°С. Следовательно,
лимитирующим фактором применения формалина для опрыскивания
им дезинфицируемой поверхности является время, в течение
которого требуемая концентрация раствора на ней в состоянии сохраниться
и его контактное действие на спору могло бы оказаться для нее
смертельным.
Т. Янагита (1980), исследуя противоформальдегидную стойкость
грибов из рода аспергиллус, поражающих тутового шелкопряда, обнаружил
у них альдегидную гидрогеназу. Фермент был выделен из
мнцелиальной массы Aspergillus flavus-oryzae, осажден сульфатом
аммония и спиртом, частично очищен. Оптимум pH для окисления
формальдегида этим ферментом — 8,1. Фермент окисляет, кроме того,
ацетальдегид (уксусный альдегид), однако его активность по отношению
к формальдегиду много выше. Изолированный фермент нестабилен
при комнатной температуре (22—25°С).
Культивируемый гриб аспергиллус проявляет максимальную про-
тивоальдегидную дегидрогеназную активность на седьмой день содержания
его при 30°С. Ферментативная активность обнаружена и у
других видов аспергиллуса, которые не подвергались когда-либо
действию формальдегида; уровень ее различен у этих видов и соответствует
их противсфюрмальдегидной устойчивости.
Хлорамин. Среди препаратов, содержащих хлор, хорошим средством
для дезинфекции червоводен оказался хлорамин. Это белый или
желтоватый, кристаллический порошок, представляющий собой натриевую
соль хлорамина бензолсульфокислоты, в которой один атом
хлора в виде натриевой соли непосредственно связан с атомом N амидной
группы. Наиболее широкое распространение в качестве универсального
средства для дезинфекции получил хлорамин Б
(C„H6S02NNaCI ■ ЗН20). Его используют для обеззараживания
различных объектов, начиная с раневых поверхностей и слизистых
оболочек и кончая неметаллическим инвентарем; он содержит 25—
29% активного хлора и растворяется в воде в количестве до 20%.
Дез: жфицирующее действие выделяемого в водном растворе хлора
на бактерий проявляется в связи с замещением им водорода в аминогруппах
макромолекул белка. Кроме того, водные растворы обладают
довольно сильным окислительным действием. Хлорамин сильнее всего
де1'ктвует на вегетативные формы бактерий, но в больших концентрациях
(10%) проявляет спороцидные свойства. Хлорамин легко растворяется
в воде, при низкой температуре и в негерметических помещениях
достаточно надежен. В сухом состоянии он очень стоек и хорошо
сохраняется при любых температурах, в бумажной, картонной, деревянной
таре в сухих и слабоосвещенных или темных помещениях.
Для дезинфекции применяются активированные растворы хлорамина.
Метод активации хлорамина впервые был применен отечественными
учеными по отношению к спорам сибирской язвы (Куликов,
Гинзбург, Виноградов, 1928). Бактерицидное действие активированных
растворов возрастает в два-три раза. Это дает возможность уменьшить
концентрацию растворов, не снижая результативности дезинфекции.
Лучшими активаторами являются аммонийные соли сильных
кислот: хлористый и азотнокислый аммоний. Вирус желтухи обеззараживается
2%-ным хлорамином с 2%-ным раствором хлористого
или азотнокислого аммония (Осипов, 1947—1948). Споры пебрины
погибают под действием 2%-ного раствора, активированного 1%-ным
раствором аммонийной соли. Хлорамин без активатора или активированный
сернокислым аммонием не оказывает необходимого действия.
Согласно рекомендации САНИИШ, для дезинфекции червоводен
и выкормочного инвентаря на каждые 10 л рабочего раствора берут
200 г хлорамина и столько же хлористого аммония или аммиачной
селитры. Оба вещества последовательно растворяют в воде (при температуре
не ниже 15°С). Раствор хлорамина с активатором годен для
употребления только в течение 2 ч. Обработанное помещение закрывают
на полдня, после чего проветривают.
Хлорамин вызывает коррозию металлов и разрушительно действует
на масляные краски; там, где это существенно, дезинфекцию
лучше проводить формалином. Хлорамин ядовит для человека и животных;
ядовит он и для гусениц тутового шелкопряда. Растворы хлорамина
при дезинфекции выделяют газообразный хлор, раздражающий
слизистую век и дыхательных путей, поэтому во время обработки помещений
надевают противогаз и спецодежду, так как раствор обесцвечивает
ткани.
Среди хлор содержащих дезинфицирующих средств достаточно
хорошо известен также гипохлорит кальция Са(С10)2. Его применяют
для обеззараживания помещений и оборудования в животноводстве,
воды в бассейнах, в медицинской и ветеринарной практике. И. П. Чи-
чигина и Ю. М. Осипова (1979) испытали его эффективность на возбудителях
болезней тутового шелкопряда, нанесенных на тканевые
тест-объекты. По заключению авторов, 1%-ный гипохлорит кальция
при норме расхода рабочего раствора 1 л на 2 м2 обрабатываемой
площади, активированный 0,2%-ной аммиачной селитрой, обладает
таким же обеззараживающим действием, как и 4%-ный формалин.
Хлорная (белильная) известь — комплекс, состоящий из гипохлорита
кальция (50—65%), гидрата окиси кальция (гашеная известь),
углекислого кальция (карбоната кальция) и хлористого кальция.
Это белый, сухой, комковатый порошок, издающий характерный
запах хлора, нерастворимый полностью в воде и образующий в ней
взвесь (известковое молоко). Осадок состоит из гидроокиси кальция
Са(ОН)2 и углекислого кальция СаСОэ. Раствор содержит главным
образом Са(С10)2 — гипохлорит кальция. Химически чистый препарат
этой соли, легко растворимый в воде, тоже применяется для
дезинфекции. Гипохлорит кальция под действием углекислого газа
и влаги воздуха или кислоты разлагается с образованием хлорноватистой
кислоты, которая, в свою очередь, становится источником
свободного хлора и кислорода.
Количество хлора, который выделяется при действии на хлорную
известь кислотой, называется активным хлором и служит для условного
обозначения окислительной способности хлорной извести. Хотя
окислителем является не хлор, а кислород, активность хлорной извести
практически удобнее рассчитывать по хлору, так как кислород
в этом веществе эквивалентен двойному числу атомов хлора. Определение
активного хлора основано на том, что известь в подкисленной
среде выделяет из раствора йодистого калия эквивалентное действующему
хлору количество йода, которое находят титрованием сантинор-
мальным раствором гипосульфита в присутствии крахмала как индикатора.
Содержание активного хлора в белильной извести колеблется
от 25 до 40%. Минимально допустимое его содержание в каждом из
трех сортов составляет соответственно 28, 32 и 35%; несортовая
известь (менее 15% активного хлора) непригодна для дезинфекции.
В
процессе хранения хлорная известь теряет часть активного
хлора, разлагается, образуется белый порошок (СаСО)3 с частичным
выделением НСЮ. Месячная потеря может колебаться от 0,25 до 3%
активного хлора. На свету, особенно солнечном, белильная известь
быстро разлагается с выделением кислорода. Повышение температуры
ускоряет разложение. В результате известь теряет обеззараживающие
свойства. Хранить ее следует в темном, прохладном, сухом помещении,
в некоррозируемой и плотно закрывающейся таре, так как
хлорная известь очень гигроскопична.
Образующейся хлорноватистой кислоте принадлежит главная роль
в обеззараживающем действии извести: разлагаясь и выделяя кислород,
она действует на микробную клетку как энергичный окислитель,
а, выделяя хлор, как источник хлорирования амино- и иминогрупп
протоплазмы.
Сухой хлорной известью посыпают поверхность почвы, места складирования
отходов выкормки из расчета 1 кг на 1 м-; применяют ее
также для обеззараживания воды.
Обеззараживающее действие извести в растворе значительно превосходит
эффективность от применения ее в виде порошка; в шелководстве
употребляют 5%-ное хлороизвестковое молоко, что соответствует
1%-ному раствору активного хлора; им дезинфицируют помещения,
употребляя свежеприготовленную взвесь для побелки стен,
дезинфекции земляного пола, для обработки выброшенной подстилки
из-под гусениц. Чтобы приготовить из хлороизвесткового молока
осветленный раствор—хлороизвестковую воду, готовят 10—20%-ную
водную взвесь в некоррозируемой емкости (керамической, деревянной):
на 10 л воды берут соответственно 1 или 2 кг извести. Взвесь
отстаивают в темном месте в течение суток, после чего отстоявшуюся
жидкость сливают с осадка и получают декантированную (слитую)
1—2%-ную хлороизвестковую воду.
Летальная экспозиция для некоторых возбудителей болезни шелкопряда
при погружении их в раствор хлорной извести следующая:
для спор возбудителя пебрины при температуре 21—26°С и концентрации
активного хлора в растворе 2%—2—5 ч, 5% —0,5—2,
10% — 1 ч и 20% — 15 мин; для конидий возбудителя мускардины
К- Миттани установил летальную экспозицию 5%-ного раствора при
температуре 20—25°С— 15 мин. По данным Лягина, споры ноземы
при 22°С в 5%-ном растворе (по активному хлору) погибали через час,
споры бактерии (сенная палочка) при температуре 18°С и концентрации
раствора 2,5% —через 2 ч; при этом гибель была не полной.
Неспорообразующие бактерии (туркестанская бактерия) в слабых
растворах (0,05 и 0,1%) при температуре раствора 18°С погибали
соответственно через 10 и 5 мин, а стрептококки гибли в первом случае
быстрее, через 5 мин. Наиболее интенсивное отмирание вегетативных
форм микробов в водных растворах этого препарата наблюдается
в первые 30 мин, затем процесс идет относительно медленно.
Недостатки хлорной извести: 1) щелочная реакция используемого
раствора, его окисляющее и белящее действие портят вещи; 2) содержание
активного хлора подвержено большим колебаниям; 3) в присутствии
органических веществ обеззараживающее действие ослабляется.
Негашеная известь (едкая известь, окись кальция
СаО). Белое пористое вещество в виде твердых глыб. Перед употреблением
для дезинфекции известь гасят, смачивая водой, вследствие чего
она сильно разогревается, выделяются пары воды. Поэтому негашеную
известь называют еще кипелкой. Твердые куски рассылаются
в мелкий сухой порошок пушонку — гашеную известь или гидроокись
кальция Са(ОН)2. Чтобы погасить 1 кг извести, надо примерно 600 c\.s
воды. Из свежегашеной извести готовят 10—20%-ное известковое
молоко. Во время приготовления раствора следует остерегаться, чтобы
брызги не попали в глаза. Известковым молоком белят помещения,
чем достигается, кроме обеззараживания, механическая изоляция
микробов на поверхности стен. Им можно заливать также зараженный
материал (подстилку, трупы червей), пол в помещении и зараженную
территорию у входа в червоводню. Наибольшим дезинфицирующим
действием обладает свежеприготовленное известковое молоко: оно
убивает не образующих споры бактерий и споры грибов. Для устойчивых
споровых форм (бациллы, нозема) обеззараживающее действие
его очень незначительно.
Просветленный раствор, получающийся после отстаивания известкового
молока, называется известковой водой и обладает свойствами
сильной щелочи. На воздухе известковая вода поглощает углекислоту
и мутнеет, вследствие образования углекислого кальция. Использование
ее для дезинфекции весьма ограничено, так же как и всякого
щелочного раствора. При хранении в сыром помещении негашеная известь
«гасится», рассыпается в порошок ив таком состоянии для дезинфекции
уже не пригодна.
Сулема HgCl2 — двухлористая ртуть; фармацевтическое название
— сублимат. Продается в виде крупных бесцветных кристаллов
или таблеток (по 1—0,5 г), часто окрашенных розовой минеральной
краской, чтобы бесцветный ядовитый раствор не был принят за чистую
воду; в таблетках сулема смешана в равных весовых частях с хлористым
натрием. Применяются обычно 0,1—0,5%-ные растворы в дождевой
или дистиллированной воде. В горячей воде лучше растворяется,
чем в холодной: при 17°С насыщенный раствор содержит 6,5% сулемы
(1 : 16). Растворы эти не имеют запаха, прозрачны и бесцветны.
Простейшая качественная реакция: капля раствора оставляет на медной
монете серебряное пятно амальгамы; реакция чувствительна
даже при разведении 1 : 5000. Для количественного определения
обычно применяется йодометрический метод объемного анализа.
Ртутьсодержащие соединения обладают снльным обеззараживающим
действием; многие органические соединения с ртутью по силе
действия несоизмеримы с сулемой. Так, минимальная концентрация,
способная задержать размножение стафилококков для хорошо известного
антисептика-мертиолята (натриевой соли этилмеркуртиосали-
циловой кислоты C2H5Hg SCeH4COONa) составляет 1 : 1000 000, а для
мерфенила (CeH5HgOH • CeHbCHgN03) даже 1 : 4 000 000, тогда как
для сулемы применительно к тем же бактериям бактериостатический
эффект достигается при концентрации 1 : 200 000. Ароматические
соединения ртути обладают более сильным бактерицидным действием
и слабее — фунгицидным, тогда как алифатические соединения ртути
(ациклические — соединения жирного ряда) сильнее действуют на
грибы и слабее на бактерий.
По отношению к спорам сулема обеззараживающего действия,
практически, почти не проявляет или обнаруживает его в слабой
степени. И, все же, растворы двухлористой ртути — наиболее сильное
дезинфицирующее средство среди тех, с которыми встречаются шелководы:
концентрация 1 : 1000 в несколько минут убивает неспоровых
бактерий. По данным Казаровой, при 24—25°С летальная экспозиция
раствора сулемы с концентрацией 1 : 40 ООО для туркестанской
бактерии и стрептококков шелкопряда составляла 5 мин. Такая же
летальная экспозиция, по данным Т. Фудзи, была получена для конидий
мускардины при концентрации 1 : 1 ООО (при концентрации
1 : 4 ООО она составляла 20—30 мин). В японском справочнике по гренажу
отмечено, что при погружении в раствор сулемы с концентрацией
1 : 200 споры ноземы шелкопряда гибнут через 5 мин, споры
бациллы тюрингиензис вар. сотто — через 8 мин, а вирус желтухи —
через полчаса.
Сулема как дезинфицирующее средство имеет существенные недостатки.
Растворы ее малостойки и разлагаются под влиянием различных
неорганических и органических веществ: белков, жиров, кислых
солей, мыла, солей щелочноземельных металлов, жесткой воды;
поэтому она не пригодна для дезинфекции объектов, загрязненных
этими веществами, покрытых масляной краской, а также при употреблении
совместно с мылом или щелочью. Сулема непригодна для дезинфекции
металлических предметов, которые амальгамируются ею.
Сулема очень ядовита и поэтому хранится по известным правилам.
Она совершенно неприменима для дезинфекции предметов, соприкасающихся
с пищей. Противоядием при отравлении людей могут служить
молоко и яичный белок, принимаемые немедленно и в большом количестве;
соединяясь с белками, сулема образует нерастворимые альбу-
минаты. Наиболее надежное средство для удаления следов сулемы
с дезинфицированных предметов — спирт.
В шелководстве сулема может быть использована для опрыскивания
червоводен и гренажных помещений 0,5%-ными растворами.
Японская инструкция не рекомендует пользоваться сулемой для дезинфекции
предметов, непосредственно соприкасающихся с кормом
и греной,^а также грено- и листохранилищами. Целесообразнее всего
использовать это сильное обеззараживающее средство в рабочих помещениях
научно-исследовательских учреждений — в лабораториях,
экспериментальных червоводнях, инсектариях и, особенно, для обеззараживания
различных предметов, соприкасающихся с зараженными
насекомыми и другими носителями инфекции. При дезинфекции помещений
потолок, пол и стены вытирают тряпкой или щеткой, смоченной
раствором, содержащим 0,5% сулемы и 1% соляной кислоты или
0,5% поваренной соли. Дезинфицируемая поверхность должна оста*
ваться мокрой в течение 20—30 мин. Лучшее время для дезинфекции —
облачный, жаркий и безветренный день. Помещения обрабатывают
последовательно, начиная с потолка; особенно тщательно смачивают
углы и щели. Во избежание порчи металлические предметы предварительно
покрывают парафином или растительным маслом. Циновки,
тростниковые и веревочные съемники, этажерки, подстилочную бумагу
смачивают раствором сулемы, чтобы она хорошо впиталась, затем
оставляют в таком состоянии на несколько часов. После этого промывают
и просушивают на солнце. Сулему употребляют также для вымачивания
халатов, спецодежды, полотенец.