6.2. Дезинфекция

Дезинфекция — обеззараживание, уничтожение во внешней среде
возбудителей болезней. Цель ее в каждом конкретном случае уничтожить
определенных патогенных микробов — причину заразных заболеваний,
поэтому дезинфекция имеет менее радикальный характер,
чем стерилизация. Стерилизация, обеспложивание — полное уничтожение
каких бы то ни было микроорганизмов и их спор в какой-нибудь
среде, лишение ее присутствия жизни; обычно это достигается
физическими средствами, например, высокой температурой.
Дезинфекции могут быть подвергнуты производственные помещения
— инкубатории, червоводни, листохранилища, папильонажные
амбары, залы микроскопирования, выкормочный и гренажный инвентарь,
выкормочная поверхность, занятая гусеницами, поверхность
грены и тела гусениц, руки и одежда обслуживающего персонала и т. д.
Однако основной зоной применения дезинфекции как меры предотвращения
заражения тутового шелкопряда является выкормка шелковичных
червей. Объясняется это тем, что главными воротами инфекции
(исключая микозов) является кишечник, через который возбудитель
болезней проникает в организм шелкопряда вместе с пищей, а единственная
стадия этого насекомого, поглощающая пищу,— гусеница.
Различают предварительную (профилактическую или предупредительную)
дезинфекцию, связанную с подготовкой к предстоящему
использованию производственных помещений и инвентаря, и текущую
дезинфекцию в ходе производственных процессов как меры поддержания
санитарного состояния рабочей обстановки. Наиболее конкретную
цель имеет заключительная дезинфекция как средство ликвидации
болезнетворных микроорганизмов, накопившихся в производственных
помещениях и на инвентаре к моменту завершения всех производственных
операций; заключительная дезинфекция проводится после
окончания выкормки, пораженной болезнью, и завершения сбора коконов.
Физические средства обеззараживания. Дезинфекцию проводят,
используя губительные для микроорганизмов и вирусов физические
и химические средства. К физическим средствам относятся разные
виды термического воздействия: кипячение, обработка зараженных
предметов сухим горячим воздухом или нагретым водяным паром,
пастеризация (нагревание жидкостей до 55—70°С с целью обезвреживания
ст микроорганизмов), тиндализация (дробная стерилизация,
чтобы предотвратить разрушение нагреваемого вещества), обжигание
пламенем паяльной лампы или лабораторной горелки (фламбирова-
ние), сжигание и др. В большинстве своем эти средства стерилизуют,
а не только дезинфицируют.
Температурное воздействие на заразное начало при прочих равных
условиях завйсит от формы применения тепла. Наиболее радикальное
средство — пламя; на пламени горелки стерилизуют лабораторные
инструменты, металлические вещи; фламбируют горлышко пробирок,
колб и пробки к ним. Сжиганием уничтожают все заразные отбросы —■
трупы гусениц, мусор и малоценные предметы.
Сухой жар используют для стерилизации в сушильных шкафах,
проглаживания горячим утюгом, нагретым до 200—250°С; эти средства
в состоянии вызвать полную гибель даже наиболее термостабильных
микроорганизмов.
Влажный жар употребляют при приготовлении микробиологических
питательных сред (стерилизация в автоклаве или коховском аппарате
паром), при кипячении, ошпаривании кипятком и т. д.; стерилизующее
действие его сильнее, чем действие сухого жара. По данным
японского справочника по гренажу, летальная экспозиция при действии
текучего пара (100еС) для спор возбудителя пебрины 20—30 мин.,
вируса желтухи — 30, спор бациллы тюрингиензис вар. сотто— 10,
спор возбудителя мускардины — 5, стрептококков шелкопряда —
3 мин.
Низкая температура не применяется, так как большинство возбудителей
выдерживает ее действие в течение продолжительного
срока.
Наиболее доступным физическим обеззараживающим средством
является солнечный свет. Губительное влияние на патогенных микробов
и вирусов прямых солнечных лучей складывается из действия
ультрафиолетовой части их спектра (наиболее результативный фактор),
прогревания и высушивания. Под влиянием высушивания сроки отмирания
микробов различны и зависят от устойчивости их к этому
фактору и от условий его действия. Обеззараживающее действие прямых
солнечных лучей в летние безоблачные дни характеризуется
следующей величиной эффективной экспозиции: вирус желтухи —
16—22 ч, споры возбудителя пебрины 6—7, споры возбудителя мускардины
— 3—5, вегетативные (неспоровые) формы бактерий —
1—2 ч. Рассеянный дневной свет действует значительно слабее; его
слабопроникающее действие может быть сведено на нет небольшим
количеством органического вещества, покрывающего микробов и выполняющего
защитную функцию. Недостаток солнечного света как
дезинфицирующего средства в том, что интенсивность освещения изменяется
и не может быть регулируема; поэтому облучение используют
дополнительно перед или после других обеззараживающих средств.
Хорошим дезинфицирующим средством являются ультрафиолетовые
лучи (Зворыкина, 1964); наиболее'губительны для вирусов и микроорганизмов
лучи с длиной волны 253,7 нм; они способны также разрушать
токсины бактерий. Очень удобным и эффективным источником
облучения являются так называемые бактерицидные лампы. Отечественная
промышленность выпускает несколько типов этих газоразрядных
ртутных ламп низкого давления с трубкой из увиолевого стекла,
с ультрафиолетовым излучением, имеющим наиболее действенную
длину волны. Бактерицидные лампы предназначены чаще всего для
обеззараживания воздуха в помещениях: при горении этих ламп в течение
суток, из расчета 1 Вт на 1 м3, количество микробов и вирусов
в облученном помещении сокращается на 60—80%.
Сильным стерилизующим действием обладают токи ультравысокой
частоты (УВЧ); при использовании наиболее результативных параметров
длины волны, мощности установки, экспозиции и температуры
— бактерицидное, спорицидное, вируцидное действие УВЧ
может обеспечить достижение полной стерильности, на значительную
глубину обеззараживаемого материала, в течение 1—3 мин. Сильным
разрушительным действием на бактерии и вирусы обладает ультразвук;
его используют для стерилизации жидкой среды, для приготовления
преципитиногена из разрушенных ультразвуком бактериальных
клеток.
Полезна в санитарном отношении тщательная уборка помещений,
удаление пыли и другие операции, выполняемые средствами механической
чистки. При неаккуратном выполнении этих операций возможно
рассеивание заразного начала. Поэтому механическую чистку необходимо
проводить после увлажнения предметов или же пользоваться
влажными тряпками, вениками и т. д. Для увлажнения употребляют
дезинфицирующие растворы, сочетая механическую чистку с химическим
обеззараживанием. Поверхности, которые могут быть вымыты
в помещении, целесообразнее всего очищать с применением детергентов
(моющих средств) горячей водой или просто щелочи (сода, поташ,
щелок).
Химические средства дезинфекции. Наиболее широкое применение
нашли химические средства дезинфекции (Окуневский, 1926—1936).
К ним предъявляют следующие требования:
а) полное и быстрое обеззараживающее действие, сопровождающееся
проникновением дезинфицирующего вещества в толщу обрабатываемой
поверхности;
б) растворимость в воде, сохранение обеззараживающих свойств
при длительном хранении и во время применения;
в) легкая удаляемость, нейтрализуемость, безопасность для людей,
безвредность для шелкопряда, а также безопасность для дезинфицируемых
предметов;
г) дешевизна, возможность приобретения в больших количествах
и простота применения.
Идеальных средств, удовлетворяющих всем этим требованиям,
нет. Поэтому при выборе вещества для дезинфекции сообразуются
с эффективностью его действия в определенных условиях, а также
с экономичностью его использования.
Из неорганических веществ в дезинфекционной практике применяют
кислоты и щелочи. Кислоты употребляют главным образом
как растворители некоторых дезинфицирующих средств; щелочи —
для усиления при дезинфекции растворяющего действия горячей
воды на белки и жиры. Такую же роль выполняют соли, дающие щелочные
растворы (сода, поташ, зольный щелок), известь (обладающая,
кроме того, некоторыми бактерицидными свойствами), а также слабые
растворы поваренной соли.
В дезинфекционной практике применяют также соли тяжелых
металлов — ртути, железа, меди (сулема, купорос).
Из органических соединений наиболее известными дезинфицирующими
средствами являются метиловый и этиловый спирты и формальдегид.
Из циклических соединений наиболее известны производные бензола—
фенолы и крезолы; особенно часто пользуются 3—5%-ным
водным раствором кристаллической карболовой кислоты, которую
не следует смешивать с «неочищенной», или «черной», или «технической
» карболкой — продуктом перегонки каменного угля, являющимся
смесью нескольких производных ароматического ряда.
Действие дезинфицирующих средств на микроорганизмы может
быть сведено, в самой общей форме, к окислительным процессам, разрушающим
отдельные компоненты протоплазмы, или к процессам необратимой
коагуляции. Например, обеззараживающее действие перекиси
водорода, перманганатов калия и хлорной извести объясняется способностью
их окислять органическое вещество микробной клетки,
тогда как соли тяжелых металлов, спирт и формалин свертывают протоплазму.
Сила действия дезинфицирующих средств зависит от: а) физических
или химических свойств их; б) продолжительности действия;
в) концентрации растворов; г) температуры растворов; д) смачиваемости
дезинфицируемых объектов и их физических свойств, облегчающих
или затрудняющих обеззараживание (пористость, шероховатость,
неровности и т. д.); е) устойчивости микробов, против которых
направлена дезинфекция.
Способ применения дезинфицирующих веществ может быть различен.
Наименее эффективно использование их в сухом состоянии,
в виде порошков (например, хлорной извести). Растворами дезинфицирующих
веществ орошают или моют объекты, подлежащие дезинфекций.
При этом так называемом влажном методе объекты можно
обрабатывать тряпкой, веником, побелочной кистью, опрыскивателями.
Обработка должна обеспечить смачивание объектов без пропусков,
экономичность расходования жидкости и высокую производительность.
Легче всего этого достигнуть опрыскивателями.
Выработаны методы дезинфекции и газообразными вещестЕами
(формальдегидом, сернистым ангидридом и т. д.), превращаемыми в газообразное
состояние химическими реакциями или выпариванием. Недостаток
этого метода — необходимость герметической изоляции
дезинфицируемого помещения, чтобы сохранить требуемую концентрацию
газа на определенное время.
Газообразные средства и аэрозоли. Наиболее ранним по времени
своего возникновения средством борьбы с заразными заболеваниями
человека и с бытовыми паразитами было «окуривание» (фумигация)
с применением газообразных средств дезинфекции и дезинсекции. Для
этого использовали двуокись серы, хлор, а в последние годы прошлого
столетия—формальдегид, бактериоубивающее действие водных растворов
которого стало известно незадолго до этого. Парами формальдегида
стали обеззараживать помещения после эвакуации из них больных
заразными заболеваниями (заключительная дезинфекция).
Формальдегид — альдегид муравьиной кислоты СН20, бесцветный
газ удушливого запаха, легко растворяется в воде (до 50%),
химически присоединяя ее и превращаясь в моногидрат СН2(ОН)2,
который почти исключительно содержится в разбавленных растворах.
При дезинфекции газообразным формальдегидом пользуются специальными
аппаратами различной конструкции; существуют также
безаппаратные способы обработки. На 1 м:1 обеззараживаемого помещения
необходимо 5 г формальдегида. Время действия — 24 ч.
И. П. Чичигина и IO. М. Осипова (1980) рекомендуют для газации
выкормочных помещений применять 38—40%-ный формалин из расчета
40 мл на 1 м3, разведенный водой в соотношении 1 : 3 и доведенный
до полного выпаривания раствора.
Начиная со второго десятилетия нашего века использование этого
средства стало сокращаться, чему содействовало рыявление многих
его недостатков, снижающих результативность обеззараживания.
Среди них главным сказалась значительная трудность в обеспечении
необходимой длительности действия на микроорганизмов губительном
концентрации. Требуемая степень герметичности может Сыть достигнута
только в специальных дезинфекционных камерах, а не в жилых
и производственных помещениях, где утечка парообразного ([юрмалина
неизбежна.
В свое время это было показано при испытании различных средств
и способов дезинфекции, в том числе, газообразного формальдегида,
против возбудителен основных болезней тутового шелкопряда. Опыты
ставились в сельских постройках Узбекистана, которые обычно использовались
для размещения выкормки гусениц старших возрастов;
жилые крестьянские дома, помещения для скота, складские постройки,
школы, клубы, комнаты в административных зданиях (Михайлов,
1932).
Газообразное химическое вещество улетучивалось сквозь щели,
которые не удалось обнаружить и достаточно тщательно законопатить,
как этого требуют правила фумигации. Кроме того, разнообразная
по своей фактуре поверхность внутри обрабатываемого помещения
вместе с находящимися в нем предметами представляет ссбсй значительную
площадь адсорбционного осаждения формальдегида, снижающего
его концентрацию. В тонких слоях адсорбированный формальдегид
быстро подвергается полимеризации, к которой он очень склонен,
опережая в этом сроки действия губительной для микробов экспозиции.
Конденсируемая на дезинфицируемых поверхностях влага
воздуха в помещении, которое должно быть при обработке достаточно
увлажнено, растворяет газообразный формальдегид, с образованием
раствора формалина слишком слабой концентрации для обеспечения
контактного бактерицидного действия. К этому следует добавить, что
способность формальдегида к проникновению в глубь пористой поверхности
(в частности — стен) проявляется довольно слабо.
Краткая экскурсия в истерию использования газообразной дезинфекции,
в частности, формальдегидом, может быть полезна для
тех, кто полагает, что многочисленные огрехи при орошении дезинфицируемого
помещения раствором фсрмалина могут быть компенсированы
проникновением газообразного формальдегида в необработанные
участки.
Специализировавшиеся на этих вопросах американские экспериментаторы
(Филлипс, Варшавский, 1958; Форт Детрик Мериленд, США),
разделяя приведенные здесь критические соображения относительно
парообразного формальдегида, считают, что теперь не составляет,
особого труда указать на более надежные средства; такие, в частности
как окись этилена. Этот фумигант при наличии псех положительных
свойств, присущих формальдегиду, обладает существенными преимуществами:
он значительно больше способен проникать через многослойные
препятствия и убивать наиболее устойчивых спорообразую-
щих бактерий; обеззараживание можно вести без необходимого для
формальдегида поддержания в помещении высокой степени увлажненности
воздуха. Еще более перспективен, с их точки зрения, пропио-
лактон — циклический эфир бета-оксипропионовой кислоты. Его
растворы и пары губительны для микроорганизмов; стерилизующая
концентрация растворов в отношении вегетативных форм — 0,2—
0,3%, споровых—0,5—0,7% (масса/объем).
В последние годы стали широко применять инсектициды в форме
аэрозолей. Аэрозоль —это система, состоящая из газообразной среды
(чаще всего, воздуха) и взр.ешенной в ней твердой или жидкой дисперсной
(раздробленной) фазы. Если дисперсная фаза представлена капельками
жидкости, такую систему называют туманом, в отличие от
дыма, образованного твердой дисперсной фазой. Крупнодисперсные
твердые фазы образуют пыль и характеризуются тем, что не д и ф ф у н дируют,
но быстро осаждаются в неподвижной воздушной среде.
Дым и пыль — аэрозоли дисперсной фазы, которая крупнее коллоидных
систем, и в этом отношении близки к дисперсности суспензий
(взвесь в жидкости твердых частиц) и поэтому их точнее было быназы.
вать аэросуспензиями, а туманы — равнозначные в том же смысле
эмульсии (взвесями нерастворяющихся мельчайших капель в жидкости)
— аэроэмульсиями.
Созданы различные технические средства получения аэрозолей,
начиная с аэрозольных шашек и аэрозольных бомб (по существу, баллонов)
и кончая аэрозольными генераторами большой мощности.
В шелководстве испытаны экономичные, не требующие сложного оборудования
способы аэрозольной дезинфекции червоводен с использованием
хлорной извести для возгонки паров формальдегида из формалина;
при этом использование хлорной извести, а не применяемого
с этой же целью перманганата калия, оказалось более дешевым,
доступным и одинаково результативным способом. Хлорную известь
и формалин берут в соотношениях 1:1 (30 : 30 г/м3); такая смесь
интенсивно вскипает и разогревается с выделением формальдегида
и хлора. Сообщается о положительных результатах такого способа
дезинфекции в отношении вируса желтухи1, а также бактерий (в том
числе спорообразующих) и конидий гриба боверии2.
Методы установления результативности дезинфекции. Чтобы выяснить
пригодность для дезинфекции химического вещества или установить
результативность того или иного метода в определенных условиях,
пользуются обычно бактериологическим контролем. Дезинфицирующее
средство испытывается на ряде бактерий с различной устойчивостью,
являющихся в этом отношении прототипом возбудителей
заразных болезней, против которых направлена дезинфекция. Такими
хорошо изученными музейными культурами бактерий (обычно сапро-
фитами) заражают полоски фильтровальной бумаги, батистовые лоскутки,
шелковые нити или гранатовые бусы. Зараженные опытные
объекты, или, как их принято называть, тест-объекты, дезинфицируют
в течение различных сроков. Чтобы по истечении нужного
срока прекратить действие дезинфицирующей жидкости на тест-
объект, его погружают в нейтрализующий раствор. Например, формалин
нейтрализуют 3%-ным раствором аммиака, сулему—раствором
сернистого аммония. После этого тест-объекты переносят в жидкие
питательные среды; отсутствие роста на питательной среде говорит
об эффективности дезинфекции. Чтобы приблизить условия испытания
к производственной обстановке, бактериальные культуры наносят на
деревянные, глиняные, отштукатуренные плитки небольшого размера.
Иногда для этого используют поверхность предметов и стен производственных
помещений.
Видовая принадлежность использованных в испытаниях бактерий
должна быть строго определенной. Чтобы узнать, сколько живых микробов
осталось на дезинфицированных тест-объбктах, по ним проводят
стерильным тампоном или смывают; с того или другого производят
засев на питательную среду и помещают в благоприятные условия для
1 А л и е в А. Г., К а р а е в И . И. А э р о зо л ь н а я д е зи нф ек ц и я против ядерного
полиэдроза тутового ш ел коп р яда . — Вестник с .-х .н ау ки , 1975, № 3 .
“ К и р и ч е н к о И. А. , Р ы х л и ч к а я А. Й. , Б у н я к Н . В. Газово-аэрозо
л ьны й способ дези нф екц и и помещений, оборудования и и нвентаря в шелковод-
:т в е . — Ш ел к , 1980, № 1 .
выявления клеток микроорганизмов, оставшихся живыми и не утративших
способность к размножению. Для сравнения эффективности действия
дезинфицирующих средств или выяснения влияния условии их
применения сопоставляют численность выживших и погибших микроорганизмов.
Графическое выражение зависимости между временем действия
дезинфицирующего агента и количеством выживших микробных клеток
имеет вид ниспадающей кривой между двумя координатами: на
одной из них — логарифмы отсчета времени, на другой — количество
живых клеток. Кривая эта получила название кривой выживания.
С помощью ее можно сопоставить результативность действия ряда химических
агентов для разных условий их применения, сравнительную
эффективность разных концентраций (Дж. и Э. Мейнелл, 1967).
Недостаток этого метода состоит в том, что у низших организмов
различить эти два состояния — живой или мертвый — на основании
способности микроба размножаться на питательной среде не представляется
возможным. Вследствие этого всякий раз остается невыясненным:
является ли действие испытуемого агента бактерицидным или
только бактериостатическим? Основанием для этих сомнений служат
найденные многочисленные средства для успешной «реанимации»
(«оживления») микроорганизмов, обработанных химическими стери-
лянтами. Например, формалин при малых концентрациях оказывает
бактериостатическое действие, которое обратимо при действии сульфата
натрия; известны также многие другие случаи «воскрешения» бактерий,
подвергнутых бактериостатическому действию дезинфицирующими
средствами, с помощью соответствующих антидотов (противоядий).
Для шелководства большое практическое значение имеет изучение
действия дезинфицирующих средств на возбудителей, которые не
культивируются на питательных средах и вместе с тем наиболее устойчивы
к различным внешним воздействиям. Такими возбудителями,
превосходящими по своей устойчивости бактерий, являются вирус
желтухи и споры ноземы. Результаты обработки их дезинфицирующими
средствами проверяются заражением не питательной среды, а самого
шелкопряда (биологическая проба).
Устойчивость патогенных микробов к дезинфицирующим средствам
неоднозначна, поэтому они не могут быть в полной мере универсальными;
выбирая обеззараживающие средства, так же как и условия
их применения, следует учитывать эти особенности. Но даже при тщательном
соблюдении этих условий, мы не можем рассчитывать на полную
результативность дезинфекции и потому реальная возможность
этого мероприятия сводится к уменьшению количества жизнеспособных
инфекционных единиц «до численности, которой можно пренебречь»
(Дж. и Э. Мейнелл, 1965).