4.10. Диагностика мускардины


Прижизненный ранний диагноз мускардины, так же как и других
инфекционных болезней насекомых, приходится стаьить визуально,
по немногим внешним признакам, большая часть которых оказывается
не характерной и свойственной не только мускардине.
Микроскопическое исследование. Существенное уточнение лри-
жизненного диагноза может быть сделано на основании микроскопи-
рования гемолимфы-подозреваемой гусеницы на предмет обнаружения
гифальных телец и последующих стадий развития гриба.
Для этого достаточно приготовить временный нативный препарат,
поместив каплю гемолимфы на предметное стекло и покрыв ее покровным
стеклом, после чего исследовать под микроскопом с 600-кратным
увеличением. Более уверенные результаты можно получить с помощью
фазово-контрастной микроскопии или же исследования временных
препаратов, но с витально (прижизненно) окрашенными объектами.
Для окраски живого, не фиксированного микологического материала
в нативном препарате можно использовать краски для прижизненного
окрашивания, такие, как нейтральрот, генцианвиолет и др. Для изготовления
временных и постоянных препаратов из высохших трупов
в микологической практике часто используют различные методы мацерации
и просветления материала, а затем их покрывают обычными
красителями микробиологических лабораторий — фуксином, метиленовой
синькой, Гимзой.
Более наглядно признаки болезни обнаруживаются визуально
на трупах гусениц; они настолько характерны, что для и< распознавания
достаточен минимальный опыт. На других этапах онтогенеза:
грены, куколки (кокона) и бабочки признаки болезни у погибших
насекомых несколько менее заметны, но все же их отличительные
черты — большая потеря массы из-за усыхания и мумификации, конидиальный
налет на поверхности довольно характерны, ими можно
руководствоваться при постановке диагноза.
Определение видовой принадлежности возбудителя. Несколько
труднее определить систематическую (видовую) принадлежность возбудителя,
но в этом случае, кроме определенных знаний и опыта
в области систематики, можно обойтись без всех тех материально-
технических средств, которые необходимы для лабораторного исследования
бактериозов или вирусных заболеваний тутового шелкопряда.
В основе определения систематического положения возбудителей
мускардины лежат морфологические особенности конидиального спо-
роношения гриба и еғо пигментообразовательная деятельность (цвет
конидиального налета и трупа). Чтобы определить тип расположения
и ветвления конидиеносцев, форму конидий и их внешний вид, достаточно
приготовить нативный препарат из соскобленного конидиального
налета с трупа насекомого и подвергнуть его исследованию под микроскопом.
По результатам исследования можно охарактеризовать общий
вид и строение плодоносящей части воздушных гиф.
Для исследования гистопатологии мускардины готовят постоян -
ные гистологические препараты из микротомированных срезов с различными
методами специальных окрасок, но эти работы выходят за
пределы диагностических задач определения вида заболевания и видовой
принадлежности его возбудителя.