6.5. Целлюляриый гренаж как профилактическое мероприятие

Из истории перестройки гренажа в интересах борьбы с пебриной.
Наиболее элективный и радикальный метод предупреждения заболевания
выкормок пебриной — приготовление грены от бабочек, несодержащих
в себе возбудителя этой болезни. Чтобы это положение
приобрело для шелководства основополагающую значимость, нужен
был авторитет Л. Пастера, подтвердившего сделанные до него наблюдения
Осимо (1859) и Виттадини (1859), что патоген может распространяться
не только от больных гусениц к здоровым, загрязняя спорами
лист шелковицы, но и через зараженную грену, отложенную больной
бабочкой. В конце 60-х годов прошлого столетия Пастер, руководствуясь
результатами своих опытов, предложил «закрыть пебрине
именно этот путь проникновения паразита на выкормки шелковичных
червей». Для этого гренопроизводство должно было оставлять
грену только от здоровых бабочек после их микроскопирования и уничтожать
зараженные кладки.
К тому времени грена успела стать предметом широкой международной
торговли, и пебрина стала распространяться по торговым путям
из стран Юго-Западной Европы в страны Ближнего Востока,
Закавказье и Среднюю Азию. Производственная деятельность гренажных
предприятий тогда еще сводилась к сортировке и удалению дефектных
коконов (скупленных тренером, чаще всего, на рынках),
к организации папильонажа, сбору грены, провеиванию ее от пыльцы
бабочек и от мусора, к мойке, сушке и развеске грены в фирменную
упаковку.
Пастер предложил новый порядок приготовления грены. Бабочек-
самок, тотчас после их распаривания, рассаживали поодиночке на
квадратные лоскутки материи. Отложивших грену бабочек заворачивали
в уголок лоскутка и закалывали, во избежание потери, булавкой,
затем их подвергали микроскопическому исследованию на присутствие
в них спор пебрины.
Новый способ приготовления грены был сопряжен с дополнительными
расходами труда и материалов, однако страх перед катастрофическими
эпизоотиями и стремление сохранить напуганную клиентуру
заставили собственников гренажных предприятий пойти на дополнительные
расходы по приготовлению грены, вызванные предложением
маститого ученого. Тренеров смущала также необходимость завести
на своих предприятиях микроскоп — прибор, который в то время был
еще связан с представлением о «высокой» науке, недоступной широкому
кругу людей. По словам Пастера, он был вынужден демонстрировать
шелководам, как его дочь, несмотря на юный возраст, успешно
справляется с микроскопическим исследованием бабочек.
Одним из участников практической реализации предложений Пастера
был австрийский ученый Ф. Габерландт (1826—1878),
работавший на шелководческой опытной станции в Граце в Штирии
(юго-восточная провинция Австрии). Он использовал для изоляции
бабочек сначала марлевые, а затем перфорированные полу пергаментные
мешочки. В Италии первым, кто применил эти мешочки на своем
гренажном предприятии, был Гвидо Сузани. Приписать приоритет
кому-либо из этих двух имен сейчас не представляется возможным,
тем более, что известный итальянский исследователь в области шелководства
Версон был частым гостем в Граце. Так или иначе, изоляционные
мешэчки из полупергамента, сложенные в форме тетраэдра, стали
вместе с микроскопом символом метода Пастера, получившего название
целлюлярного гренажа.
В стране исконного и наиболее развитого шелководства — в Японии,
где бабочки местных пород откладывают приклеивающуюся
грену, заимствованный метод целлюлярного гренажа был видоизменен.
Изоляция бабочек осуществлялась на картоне, разграфленном
на 28 нумерованных квадратов и напоминающих по форме карточки
для игры в лото. Бабочек раскладывали по этим клеточкам и изолировали
друг от друга высокими металлическими кольцами, мешающими
им перемещаться на соседнюю клетку. После откладки грены бабочек
раскладывали по 28 нумерованным ячейкам картонного пенала,
в соответствии с нумерацией на картоне.
Сущность целлюлярного гренажп. Наиболее последовательная
и строгая система целлюлярного гренажа разработана и освоена государственной
гренажной промышленностью Советского Союза. В
первые годы существования Советского государства на созданных
в шелководческих республиках многочисленных гренажных заводах
был внедрен разработанный на основе достижений отечественной
(Шавров, Жмуйдзинович, Иванов, Платов, Щербаков и др.) и зарубежной
науки и практического опыта единый принцип построения технологии
промышленного целлюлярного гренопроизводства (Щербаков,
1952; Ковалев, Шевелева, 1966).
Согласно ныне существующей схеме построения племенной работы,
грену предварительного размножения из районированных пород,
одобренных Государственной породоиспытательной сетью, готовят
племенные станции. Приготовленную ими грену передают гренажным
заводам для выкармливания племенных партий коконов. Из племенных
коконов на заводе производят основной вид продукции — грену
для промышленных выкормок в колхозах и совхозах, представляющую
собой гибридные комбинации, полученные путем спаривания бабочек,
вышедших из племенных коконов. Коконы промышленных выкормок
направляют в морку, где они разматываются на шелкомотальных фабриках,
а шелк-сырец служит сырьем для текстильной промышленности.
Микроскопическая проверка на зараженность производится на
всех этапах гренопроизводства. Первое выборочное микрсскопиче-
ское исследование в прежние годы проводили на заводе, перед инкубацией
племенной грены: исследовались на пебрнну заранее отобранные
и инкубированные образцы. На племенных выкормках, начиная
с третьего возраста, проводится проверка на зараженность гусениц
пебриной. Микроскопическому исследованию подвергают образец
гусениц с каждой коробки грены и, прежде всего,— отставшие в развитии
и подозрительные на заболевание, обнаруживаемые чаще в под-
сгнлке.
Выкормки, на которых обнаружены пебринозные гусеницы, сжигают
вместе с подстилкой, а помещение выкормки, выкормочный инвентарь
и прилегающую к червоводне территорию дезинфицируют.
Поступившие на завод коконы предварительно оценивают по урожайности
и количеству карапачаха, которое не должно превышать
1% от массы партии. Каждую принятую заводом партию коконов
подвергают микроскопическому исследованию на зараженность пебриной;
эта проверка называется предварительным исследованием по
куколке. Для этого из каждой партии отбирают образцы (100 коконов)
и инкубируют их до полного созревания куколок; как только у куколок
потемнеют глаза, их по одной растирают вступкахс несколькими
каплями дистиллированной воды. На предметное стекло наносят три
капли, по одной из каждой ступки. Каждый препарат (т. е. каплю под
покровным стеклом) исследуют в трех полях зрения. При обнаружении
спор в каком-либо препарате партию ксконов отправляют в морку.
Второе предварительное исследование проводится по бабочке.
Это вызвано тем, что у куколок не все плазмодии ноземы успели превратиться
в споры и потому случаи позднего заражения шелкопряда
на выкормке могут быть пропущены. Для этого исследования в персый
день вылета бабочек и не позже второго дня их выхода из кокона
из каждой партии коконов, принятых в гренаж и разбитых по полу,
выборочно отбирают 100 бабочек. Стараются отбирать главным образом
самцов, чтобы уменьшить расход самок. Для микроскопирования
растирают всю бабочку, кроме крыльев. Партии, в образце которых
по результатам микроскопирования оказалась хотя бы одна пебриноз-
ная бабочка, отправляют в морку.
Второе предварительное исследование, которое проводится по
бабочкам, должно быть завершено в короткий срск — до начала их
изоляции. По итогам микроскопирования этих бабочек подтверждается
пригодность коконов для гренопроизводства и определяется норма
их изоляции. По первоначальным правилам приготовления целлю-
лярной грены при зараженности партии от 0 до 1% — изолировали
r одном мешочке три бабочки, при заражении 2—3% — по две, более
3% — по одной бабочке.
По истечении одного месяца после откладки грены и перед сплошным
микроскопированием бабочек кладки грены сортируют, удаляя
по внешнему виду «физиологический брак» и неполноценные кладки;
затем приступают к микроскопированию бабочек. При сплошном
микроскопировании всех бабочек, отложивших грену. оторванное от
головогруди брюшко растирают на специальных машинах, в ступке
вместе с несколькнми каплями воды. Из трех ступок наносят по одной
капле на одно предметное стекло и каждую каплю покрывают стеклом.
Каждую каплю, называемую тренерами препаратом, микроско-
пируют в пяти полях зрения. При исследовании племенных партий
брюшко бабочки растирают в ступке вручную и препарат рассматривают
в 10 полях зрения. Результат сплошного микроскопирования партии
кладок с зараженностью не более 1 % контролируют по оставшейся
жидкости с растертым брюшком, предварительно слив ее из девяти
ступок в одну. По результатам анализа кладки делят на здоровые,
зараженные и сомнительные — с различными микроорганизмами,
в том числе похожими на споры пебрины. Зараженность партий кладок
в процентах определяют по числу пебринозных бабочек (т. е. препаратов),
деленных на общее число исследованных бабочек и умноженных
на 100. Если в партии более 1 % зараженных кладок, ее уничтожают.
Партию с более слабым заражением направляют на производственное
контрольное микроскопирование по головогруди бабочек.
Следовательно, помимо брюшка бабочек, отдельному микроскопированию
подвергается также их головогрудь. При заражении партии
от 0,6 до 1 % в одной большой ступке вручную растирают головогрудь
от четырех бабочек, при 0,1—0,5% —от шести бабочек. Из партий,
свободных от заражения по результатам сплошного микроанализа,
в одной ступке растирают головогрудь от восьми бабочек. Производственный
контроль выполняется штатом микроскопистов-контро-
леров.
Продукцию гренажных заводов проверяла Государственная инспекция
по качеству грены Министерства сельского хозяйства СССР.
Контролировалась вся грена, приготовленная отечественными заводами,
племенными шелководческими станциями, научно-исследовательскими
учреждениями или импортированная в нашу страну. Инспекция
отбирала на заводе образцы грены; от промышленной — вдвое
меньше образцов, чем от племенной. Образцы выдерживали не менее
месяца при температуре зимовника (+2, +4°С), затем грену инкубировали
до почти полного выхода гусениц. Анализ зашифрованных
образцов поручался другому гренажному заводу, которому не было
известно происхождение грены. Для анализа все содержимое инкубированного
образца — гусеницы, неожившая грена и скорлупки —
помещают в ступку и растирают в 2%-ном растворе едкого калия или
едкого натра. Госинспекция разрешает реализацию только той партии
грены, в которой не была обнаружена пебрина. В наши дни функции
государственного контроля возложены на управления шелководства
Министерства сельского хозяйства республик.
За годы своего существования технология отечественного гренопроизводства,
многие стороны его оснащения и организации претерпели
ряд существенных изменений. То, о чем здесь сообщалось, не
имело в виду ознакомить читателей со всеми сторонами работы гренажных
заводов наших дней.
Цель этого краткого описания, опускающего многие технологические
детали, показать, что, создавая промышленное гренопроиз-
водство, у нас стремились, прежде всего, к тому, чтобы оно функционировало
как непроницаемый для пебрины многослойный фильтр. При
современных укрупненных масштабах производства такая «ювелирная
» технология целлюлярного гренажа оказалась труднореализуемой.
Для тех, кто закладывал фундамент советского шелководства,
ставка на борьбу с пебриной средствами промышленного грене-
производства имела свое основание. В те годы шелководство в егоис-
конных зонах сохраняло еще нетронутыми особенности этого древнего
народного промысла, основанного на домашнем приготовлении греиы.
Перспектива замены домашней грены продукцией заводов, за которую
приходилось платить деньги, представлялась всем нам тогда нелегким
процессом, в котором главным союзником могла стать гарантированная
незараженность грены.
Много позже, когда целлюлярный гренаж достиг определенных
результатов в борьбе с пебриной, усилия гренажных заводов были
направлены на расширение объема производства грены, как этого требовало
увеличение производства коконов. Предстояло осуществлять
это в рамках имеющегося технического обеспечения и сложившейся
технологии гренажа; к решению этой задачи шелководы не были готовы.
В поисках выхода за счет устранения наиболее трудоемких
процессов пришлось пойти по наиболее легкому пути — пересмотру
существовавших нормативов изоляции бабочки и уплотненному ми-
кроскопированию.
Варианты отступления от принципов целлюлярного гренажа.
В европейских странах, после того как микроскопирование бабочек
стали применять в гренопроизводстве, предриниматели широко использовали
форму выборочного контроля на зараженность бабочек.
Партии из большего или меньшего количества бабочек, не разобщенных
изоляцией, откладывали совместно грену, и контроль за ее зараженностью
устанавливался выборочно, путем микроскопирования
нескольких бабочек, чтобы иметь примерное представление об уровне
инфицированное™ всей отложенной грены. Этот, намного более
дешевый, но гораздо менее надежный способ приготовления грены,
получил названне индустриального. Индустриальный способ приготовления
грены был подсказан коммерческими интересами предпринимателей,
а перед наукой, обслуживающей эти интересы, была поставлена
задача обосновать целесообразность этих начинаний. В нашей
стране, с первых лет существования советского шелководства, индустриальный
метод приготовления грены был решительно запрещен.
Имелось в виду, что гренопроизводство, как всякая племенная работа,
является фундаментом прогресса отрасли и при ее организации неразумно
руководствоваться коммерческими соображениями.
Неуклонное и последовательное соблюдение целлюлярного принципа
приготовления грены и высокая требовательность к качеству
работы на протяжении четверти века привели к тому, что на гренажных
заводах Среднеазиатских республик, где еще недавно использовалась
не свободная от пебрины грена домашнего приготовления («джой-
доры»), зараженность снизилась до тысячных долей процента, а лаборанткам
— чтобы не забывали внешнего вида спор — приходилось
время от времени показывать демонстрационные препараты. В связи
с этим И. А. Щербаков (1952) в свое время предупреждал: «Исследсьа-
ние, таким образом, сводится к просмотру основной массы совершенно
здоровых кладок. Вследствие этого возникла вредная мысль, нельзя
ли уплотнить препараты и составлять их из содержимого не одного
мешочка, а нескольких». Искушение «упростить» целлюлярный гренаж
и на этой основе несколько удешевить приготовление грены было
очень велико. С. А. Миносьянц предложил на заводах, где зараженность
пебриной составляла менее 0,05%, использовать групповую
изоляцию из пяти бабочек. В. А. Струнников разработал способ укрупненной
групповой изоляции бабочек с уплотненным микроскопи-
пированием, предназначенный для заводов с низким уровнем зараженности
партий: при зараженности 0,001% изолируется по 100бабочек,
при зараженности 0,001—0,05% — по 50 бабочек, при зараженности
более 0,05% — по 25 бабочек. Для их изоляции были рекомендованы
коробочки вместо мешочков. Уплотненное микроскопирование, предложенное
В. А. Струнниковым (1966), предусматривало более тщательное
микроскопирование с применением отстаивания и центрифугирования
микроскопируемой жидкости, использованием фазово-контрастного
устройства и некоторых других особенностей организации
микроскопического анализа.
В сочетании с некоторыми организационно-техническими средствами,
страхующими от ошибок при анализе, методы групповой
изоляции в своих крайних выражениях вплотную приближались
к индустриальному способу приготовления грены. Более того, в таком
виде они стали проникать в практику работы тех заводов, где в течение
ряда лет не наблюдалось заражения пебриной. В одних случаях эта
модификация состояла в том, как это имело место в практике приготовления
грены в Туркменской ССР и в РСФСР, что анализ на пебрину
ограничивался микроскопированием гусениц во время выкормки
и предварительным анализом по куколке и бабочке. На других гренажных
заводах групповая изоляция по 50 и 100 бабочек помогала преодолеть
организационные трудности, особенно в дни их массового
вылета.
Еще более решительным отходом от целлюлярного способа приготовления
грены, рассчитанным на то, чтобы совершенно избавить
завод от операций по микроскопированию бабочек, был так называемый
биологический способ приготовления грены, предложенный
Э. Ф. Поярковым (1945). Куколок в коконах прогревают в специальных
термокамерах («биокамерах», после чего весь процесс
приготовления грены идет в обычном порядке, но без операций по
изоляции самок и микроскопированию их. Термическое воздействие
существенно снижало зараженность кладок, но некоторое «остаточное
» присутствие патогена все же сохранялось.
Второй метод приготовления грены с использованием ее термической
обработки без микроскопирования бабочек был предложен
Б. А. Астауровым (1952).
Причины появления зараженном грены в продукции гренажных
заводов. Замена принципов целлюлярного гренажа, в том виде, как
он был разработан специалистами, стоявшими у колыбели советского
шелководства, на более простые и дешевые способы приготовления
грены, но с большей вероятностью пропуска герминативной инфекции
довольно быстро обнаружила свою слабую сторону. Вспышки
заболевания пебриной на выкормках стали поводом для серьезного
беспокойства и вызвали попытку уяснить причину их появления, не
затрагивая, предпочтительно, тех перемен в технологии гренопроизводства,
которые были к этому причастны. В свое время, до начала «модернизации
» целлюлярного метода, когда на отдельных заводах по
причине производственных упущений пебрине-удавалось «проскочить»,
в Среднеазиатском НИИ шелководства возникли споры относительно
возможности существования слабых степеней заражения бабочек,
которые легко могут быть пропущены при заводском микроскопиро-
вании. Вопреки этим суждениям, некоторые специалисты (И. А. Щербаков
и др.) считали, что слабые степени заражения бабочек,которых
не может обнаружить лаборантка, если они существуют в действительности,
вряд ли могут представлять опасность как источник герминативного
заражения грены, так как яичники гусеницы заражаются
в последнюю очередь.
При чрезмерной «массированной» изоляции бабочек возникла
возможность появления «слабых степеней заражения» иного и более
вероятного происхождения; споры из единичных пебринозных бабочек
в условиях уплотненного микроскопирования могут оказаться так
сильно разбавлены в эмульсии всей массы растертых бабочек, что
вероятность их обнаружения будет крайне низкой. Имея в виду это
обстоятельство, необходимо предостеречь от оптимизма тех, кто считает
опасность пропуска слабых степеней заражения преувеличенной.
Достаточно сказать, что герминативный путь формирования эпизоотий
пебрины обеспечивается именно относительно слабыми степенями
заражения отдельных бабочек. У сильного заражения — уж если на
то пошло — возможностей для распространения трансовариальным
путем меньше, так как при большом количестве спор, заглатываемых
гусеницей, она погибает от септицемии, вызванной кишечной микрофлорой.
При сильном инфицировании спорами гибель от септицемии
в течение первых пяти дней может достичь 50% и более. Кроме того,
гусеницы, зараженные пебриной, особенно легко становятся жертвой
активизированного латентного вируса желтухи, который вызывает
гибель шелкопряда раньше, чем разовьется нозематоз. Только
при небольших дозах заражения и притом в старших возрастах, не
превышающих 200—300 спор на одну гусеницу, становится возможным
такое развитие заболевания, которое приводит к герминативной
инфекции. Вместе с тем именно герминативный путь распространения
пебрины является наиболее мощным эпизоотологическим фактором по
сравнению с прижизненным заражением.
Эти критические замечания не следует понимать так, будто целлю-
лярный способ приготовления грены является пределом человеческих
возможностей в борьбе с пебриной. На смену ему может прийти более
совершенный во всех отношениях метод. Однако нельзя судить о ценности
метода вне реальной обстановки, существующей на гренажных
заводах с их высокими производственными планами, которые слабо
механизированы, не всегда должным образом обеспечены в технологическом
и, особенно, в организационном отношении. Нередко вызывают
озабоченность слабая обеспеченность рабочей силой, техническими
кадрами, недостаточно высокий уровень их квалификации. Наконец,
стремительность биологических процессов в гренаже при их больших
масштабах — постоянная угроза, готовая смять производственные
графики завода, нарушить заданный ритм работы. У целлюлярного
гренажа в подобных ситуациях были надежные подстраховывающие
резервы в виде каскада микроанализов, следующих через весь производственный
процесс, на всех без исключения этапах приготовления
грены. Поэтому усложненность последовательной системы целлюлярного
гренажа следует рассматривать как издержки производства,
порожденные существующими условиями работы гренажных предприятий
и оказывающиеся необходимыми ради сохранения качества продукции.
Нельзя забывать, что гренопроизводство — своеобразная разновидность
семеноводческого дела, где категорическим требованием
является соблюдение качественных показателей продукции; все то,
что может внести элемент риска при достижении этих настоятельных
требований, полностью противопоказано этому виду производства.
История отечественного гренопроизводства знает случаи, когда
в результате снижения требовательности система целлюлярного гренажа
не могла в полной мере справиться с возложенной на нее задачей
— обеспечения выпуска здоровой грены. Так, один из крупнейших
в Советском Союзе по размерам производства Самаркандский гренаж-
ный’завод в начале40-х годов вынужден был выполнять производственные
планы, вдвое превышающие его проектную мощность, и вместо
30 тыс. приготавливать 60—65 тыс. коробок грены в год. Не имея
возможности разместить на своей производственной площади весь
объем работы, завод вынужден был рассредоточить часть папильо-
нажа на внезаводских пунктах, снизив тем самым эффективность инженерно-
технического контроля за выполнением этой части операций.
Изоляция бабочек не поспевала за ходом папильонажа и часть преждевременно
отложенной грены оказалась в мешочках с бабочками, не
имевшими к ней отношения. Кроме того, источником заражения выкормок
в хозяйствах, соприкасающихся с племенным районом завода,
а частично и в самом районе, были выкормки из грены домашнего приготовления,
неблагополучные по пебрине; присутствие их не всегда
удавалось обнаружить среди основной массы гусениц из целлюлярной
грены, хотя по существовавшим тогда законам они подлежали уничтожению.
В результате государственной инспекцией было забраковано
и сожжено из продукции завода в 1938 г. около 1200, в 1939 г.—
2500, в 1940 г.— 5000, в 1941 г.— 7000 коробок грены. Было решено
поручить техническое руководство заводом одному из тех опытных
специалистов, которые с самого начала рождения советской гренажной
промышленности принимали участие в ее становлении. Понадобилось
два года квалифицированных усилий для восстановления нормального
целлюлярного технологического режима. В итоге в 1942 г*
количество забракованной грены снизилось до 500 коробок.
Несколько раньше в Туркмении трем гренажным заводам в Чарджоу,
Мары и Фирюзе предстояло в течение года почти вдвое увеличить
производство грены (с 50 тыс. до 90 тыс. коробок); заводы вынуждены
были расширить зону племенных выкормок, не проведя предварительных
мер по оздоровлению привлекаемых для этого новых хо*
аяйств. В результате в 1931 г. продукция этих заводов оказалась сильно
заражена пебриной и к реализации было допущено только 18,5 тыс*
коробок. Однако последовавшее за этим особенно тщательное выполнение
правил по производству целлюлярной грены на всех этапах ев
приготовления позволило в два-три года значительно снизить зараженность,
а затем полностью оздоровить продукцию этих заводов. Если
в 1931 г. зараженность грены составляла 29%, то в 1932 г. она снизилась
до 5,25% (более,чем в пять с половиной раза), в 1933 г.— 2,18%.
в 1934 г._ 0,33%, в 1935 г.—0,08% и в 1936 г.—0,03%.
Приведенные примеры свидетельствуют о способности последовательной
системы целлюлярного гренажа обеспечивать быстрое оздоровление
гренопроизводства, даже тогда, когда эту операцию приходится
сочетать с выполнением напряженных производственных планов.
Подобные случаи — подлинное испытание на прочность, на надежность
целлюлярного метода приготовления здоровой грены. К сожалению,
рационализаторы гренопроизводства не сочли нужным обеспечить
дальнейшее сосуществование принципа целлюлярного гренажа.
Под знаком борьбы за сокращение трудовых затрат и экономии производственного
времени осуществлялся переход к укрупненной групповой
изоляции бабочек и уплотненному микроскопированию. Разрабатывались
механизмы для отдельных звеньев технологического процесса
с тем, чтобы подготовить перевод производства на частичные
или связанные конвейерные циклы. При этом игнорировалась возможность
внести радикальные изменения в технику микроскопического
анализа бабочек, приблизив ее к современному уровню достижений
в этой области.
Между тем отечественная наука располагает реальными возможностями
решать эту задачу на основе успехов оптико-структурного
машинного анализа, автоматизации количественных исследований
микроструктур, осуществляемых с участием ЭВМ и не только в световом,
но и в высоковольтном электронном микроскопе. Новейшие достижения
науки и техники находят широкое применение в микроскопическом
контроле за биологическими процессами в микробиологической
промышленности, в медицинской патологической гистологии, минералогии
и металловедении. Использование этих методов и приборов
позволило бы гренопроизводству обеспечить экономию времени и затрат
труда и вновь вернуться к принципам целлюлярного гренажа,
к индивидуализации анализа бабочек, сохранить большое количество
кладок, уничтожаемых при уплотнененном микроскопировании, повысить
надежность избавления выкормок от герминативной инфекции
пебрины.